期刊简介

  本刊贯彻执行党的中医政策,发扬实事求是学风,继承弘扬中国传统医药文汇 ,宣传中医药临床应用,尤其在治疗某些疑难杂症等领域有巨大优势和发展前景。

   

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  • 杂志名称:现代中医临床杂志
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:北京中医药大学
  • 国际刊号:2095-6606
  • 国内刊号:10-1157/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:期刊收录:知网收录(中), 万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏
现代中医临床杂志2015年第02期

益心解毒方对Nox2和Nox4亚基过表达的心肌细胞NADPH氧化酶活性的影响

解华;麻春杰;郭淑贞;张前;付帮泽;高阔;王伟

关键词:益心解毒方, H9C2心肌细胞, 过表达, NADPH 氧化酶活性
摘要:目的:通过观察益心解毒方含药血清对Nox2、Nox4亚基过表达的H9 c2心肌细胞NADPH氧化酶活性的影响,揭示其作用环节是否与干预相应亚型的 NADPH 氧化酶调控环节有关。方法采用PCR方法扩增Nox2、Nox4基因全长序列,经双酶切、连接载体和转化后提取重组质粒,经酶切鉴定的阳性质粒进行DNA测序,测序正确后按照lipofectamine 2000试剂的说明书瞬时转染H9 c2细胞,转染后的心肌细胞分组给予不同的药物干预,24 h 后检测 NADPH 氧化酶活性。结果①含有Nox2/Nox4亚基的重组质粒载体通过测序鉴定,结果与GenBank报道的完全一致。②通过荧光显微镜下观察转染72 h后的H9 c2细胞,可见大量发绿色荧光的细胞,流式细胞术计数结果显示转染率均在60%左右,符合实验要求。③空质粒载体组、模型组、益心解毒方组的NAD-PH氧化酶活性表达明显高于正常组( P<0.01,P<0.05);模型组和益心解毒方组的NADPH氧化酶活性表达高于空载体组( P<0.01);模型组NADPH氧化酶活性表达均明显高于其他各组,而益心解毒方各组的NADPH氧化酶活性表达均明显低于模型组( P<0.01, P<0.05)。结论成功构建大鼠心肌细胞Nox2、Nox4亚基的重组质粒载体,该重组质粒载体可以在心肌细胞中过表达,益心解毒方可以有效地降低NADPH氧化酶活性的表达。提示此复方治疗心衰的机制可能是抑制了Nox2和Nox4型NADPH氧化酶的表达。